产品货号：
KD1081
中文名称：
超声裂解缓冲液(大量提取)
英文名称：
ultrasonic lysis buffer
产品规格：
100mL|500mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
保存：2～8℃
产品说明：
原核蛋白表达纯化实验中，首先需要对大肠杆菌进行裂解。常用的方法有超声破碎，溶菌酶酶解等。本产品提供超声裂解时的缓冲液。
使用说明：
1.临用前，每10mL的超声裂解缓冲液中，加入60μL～120μL的100mM的PMSF溶液。
2.离心富集菌体。4℃ 4000g离心20min或4℃ 15000g离心1min，弃上清，收集沉淀。随后即可进入细菌裂解步骤，也可以在-20℃或-80℃冻存备用。冷冻保存的菌体使用前需置于冰上解冻15min。
3.对于新鲜的或解冻的细菌沉淀，按照每克细菌沉淀湿重加入2～5mL超声裂解缓冲液的比例加入超声裂解缓冲液，充分重悬菌体。
4.冰上超声裂解细菌。超声功率200-300W，每次超声处理10s，每次间隔10s，共超声处理6次。
注：具体超声处理的方式需根据特定型号的超声仪器自行摸索和优化。
5.(可选做)如果超声处理后裂解液非常粘稠，可以加入RNase A至10μg/mL及DNase I至5μg/mL，冰上放置10～15min。或者也可以使用适当的装好了较细针头的注射器，反复抽吸数次，以剪切粘稠的基因组DNA等。
6.4℃ 10000g离心20～30min，收集细菌裂解液上清并置于冰水浴或冰上。可以取20μL上清留作后续检测用。
注：上清必须保持澄清，即不含任何不溶物，才能进行下一步的纯化。上清中如果混有不溶性杂质会严重影响后续纯化获得蛋白的纯度
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